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液氮罐使用注意事項
2009-9-16
3055
液氮罐的使用與保管需注意以下幾個方面:一、使用前的檢查液氮罐在充填液氮之前,首先要檢查外殼有無凹陷,真空排氣口是否完好。若被碰壞,真空度則會降低,嚴重時進氣不能保溫,這樣罐上部會結(jié)霜,液氮損耗大,失去繼續(xù)使用的價值。其次,檢查罐的內(nèi)部,若有異物,必須取出,以防內(nèi)膽被腐蝕。二、使用過程中的檢查使用過程中要經(jīng)常檢查??梢杂醚塾^測也可以用手觸摸外殼,若發(fā)現(xiàn)外表掛霜,應停止使用;特別是頸管內(nèi)壁附霜結(jié)冰時不宜用小刀去刮,以防頸管內(nèi)壁受到破壞,造成真空不良,而是應將液氮取出,讓其自然融化...
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ELISA的概念、原理、操作步驟
2009-9-11
2739
ELISA的概念、原理、操作步驟ELISA是酶聯(lián)接免疫吸附劑測定(Enzyme-LinkedImmunosorbnentAssay)的簡稱。它是繼免疫熒光和放射免疫技術之后發(fā)展起來的一種免疫酶技術。此項技術自70年代初問世以來,發(fā)展十分迅速,目前已被廣泛用于生物學和醫(yī)學科學的許多領域。(一)原理ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結(jié)合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,...
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甲基化芯片在遺傳學中的應用
2009-9-9
2579
表觀遺傳改變可以定義為基因的遺傳性或獲得性改變,但是這種改變和DNA序列改變無關。DNA甲基化是zui為常見的表觀遺傳改變;啟動子或*外顯子CpG島中的甲基化改變將導致基因表達失活;組蛋白的化學修飾也可以作為表觀遺傳改變;組蛋白發(fā)生乙?;淖兊幕蛲ǔ1婚_啟。CpG島的異常甲基化是導致基因沉默和過度表達的zui主要的改變,常規(guī)的方法不能在全基因組水平上對甲基化進行檢查。表觀遺傳分析與基因芯片技術結(jié)合起來則可以高通量進行甲基化的定性、定量分析。目前建立了2種基于芯片的甲基化分析...
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DNA的不同提取方法及比較
2009-9-7
3570
DNA的不同提取方法及比較傳統(tǒng)的DNA提取方法傳統(tǒng)的DNA提取與純化,如CTAB法、SDS法是在裂解細胞的基礎上,多次苯酚氯仿等有機溶劑抽提使蛋白質(zhì)變性沉淀于有機相,而核酸保留在水相,達到分離核酸的目的;加入RNA酶除去核酸中的RNA;然后加入異丙醇、乙醇等沉淀DNA;用70%乙醇漂洗沉淀,除去分離過程中殘留的有機溶劑和鹽離子,以免影響核酸溶解和抑制后續(xù)步驟的酶促反應,zui后用TE溶解DNA備用。CTAB是一種陽離子去污劑,能與核酸形成復合物,此復合物在高鹽(0.7mol/...
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如何預防細胞培養(yǎng)的污染問題
2009-9-4
3447
體外培養(yǎng)的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養(yǎng)的始終,才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。一般預防可從以下幾方面著手:1、從物品、用品消毒滅菌著手細胞培養(yǎng)所用物品清洗、消毒要*,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應選擇zui后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養(yǎng)箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養(yǎng)...
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固相萃取--樣品預處理的關鍵核心技術
2009-8-31
3432
固相萃取柱用于HPLC,GC,LC-MS/MS,GC-MS或其他技術分析樣品的制備。廣泛應用在藥物代謝及動力學、藥物分析、生物檢測、毒品和興奮劑檢測、食品安全分析、環(huán)境分析等領域。固相萃取柱應用的科學原理很簡單:一是讓待檢測的化合物通過固相萃取柱,而讓雜質(zhì)保留在固相萃取柱上,應用廣泛的實例包括C18,PSA,NH2固相萃取柱于農(nóng)殘分析;另一種策略就是讓雜質(zhì)穿過固相萃取柱,固相萃取柱有選擇性地濃縮和保留待檢測的化合物。固相萃取就是一種“開、關”原理,待檢測化合物要么*保留再洗脫...